JZZIJZZIJ亚洲乱熟无码,99E久热只有精品8在线直播,国产AV国片偷人妻麻豆,囗交50个动态图片

網(wǎng)站首頁  ◇  技術(shù)支持  ◇  PCR新手指南系列:PCR產(chǎn)物電泳條帶分析
PCR新手指南系列:PCR產(chǎn)物電泳條帶分析
  • 發(fā)布日期:2016-03-03     信息來源:      瀏覽次數(shù):18878
    • PCR擴(kuò)增后一般進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳分析,電泳后一般有以下幾種條帶:
      1、引物帶。引物濃度過高或是擴(kuò)增效率不是特別高時(shí)都會(huì)有,一般不呈現(xiàn)為細(xì)帶,為發(fā)散狀;如果目的擴(kuò)增產(chǎn)物帶和引物帶都很亮,可以考慮適當(dāng)降低引物量。

      2、引物二聚體帶。比引物跑得慢一點(diǎn),條帶清晰,但如果擴(kuò)增產(chǎn)物小于100bp時(shí),產(chǎn)物與引物二聚體就不好分別了,建議采用DNA聚丙烯酰胺電泳(不是蛋白質(zhì)的SDS聚丙烯酰胺電泳);如果引物二聚體在優(yōu)化復(fù)性溫度后仍然嚴(yán)重影響目的產(chǎn)物的擴(kuò)增,優(yōu)先考慮更換引物設(shè)計(jì)(因?yàn)橐锖铣傻某杀颈确磸?fù)優(yōu)化條件的成本低)

      3、目的擴(kuò)增產(chǎn)物帶。其大小與設(shè)計(jì)大小相同,條帶清晰。

      4、非特異擴(kuò)增產(chǎn)物帶。其大小與設(shè)計(jì)大小不相同,條帶清晰。一般考慮通過提高復(fù)性溫度來減少或消除(也可用溫度梯度功能來尋找*的復(fù)性溫度,東勝龍811型PCR儀就有此功能)。如果其片段大小比目的片段大較多,可以通過減少延伸時(shí)間來減少或消除(即不給它足夠的延伸時(shí)間)。還有一種非特異擴(kuò)增產(chǎn)物帶是來自于逆轉(zhuǎn)錄PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)的基因組DNA的污染,如果目的擴(kuò)增產(chǎn)物中有內(nèi)含子,擴(kuò)增產(chǎn)物很可能大于目的基因。這種條帶通過優(yōu)化復(fù)性溫度是不能消除的,可以在逆轉(zhuǎn)錄前用無RNA酶的DNA酶進(jìn)行樣本處理。
       

      5、模板DNA帶。模板濃度過高時(shí)可能出現(xiàn)。如果是基因組DNA為模板,條帶可能會(huì)很亂且較大。一般進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí),模板濃度都不要太大,否則會(huì)產(chǎn)生一些比目的基因長一點(diǎn)的雜質(zhì)DNA(可能不成條帶,也看不到),這是由PCR擴(kuò)增原理造成的。

      上海嘉鵬科技有限公司專業(yè)生產(chǎn):紫外分析儀、三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀、暗箱三用紫外分析儀、暗箱紫外分析儀、手提式紫外分析儀、三用紫外分析儀暗箱式、紫外檢測儀、部分收集器、恒流泵、蠕動(dòng)泵、凝膠成像系統(tǒng)、凝膠成像分析系統(tǒng)、化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng)、光化學(xué)反應(yīng)儀、旋渦混合器、漩渦混合器、玻璃層析柱、梯度混合器、梯度混合儀、核酸蛋白檢測儀、玻璃層析柱、熒光增白劑測定儀、餾分收集器、切膠儀、藍(lán)光切膠儀、層析系統(tǒng)等產(chǎn)品。咨詢。